Un serotipo se refiere a un grupo de microorganismos que se distinguen por sus antígenos y la respuesta que producen, de modo que estos serotipos se encuentran relacionados a los lipopolisacáridos de la superficie de la bacteria respectiva. De esta manera la serotipificación es un complemento en el estudio bacteriano, al igual es útil para el estudio de brotes, así como para conocer la fuente de infección y vías de transmisión. Por lo que, de acuerdo con la Organización Mundial de la Salud (OMS), se clasificó Haemophilus influenzae con respecto a sus antígenos capsulares en 6 grupos o serotipos, denominándose con las letras a, b, c, d, e y f. (Organización Panamericana de la Salud, 2021; Gómez y cols., 1991; Zerón, 2010)
De esta manera la identificación de Haemophilus influenzae se realiza a partir de la prueba de los requerimientos de los factores X y V como de la serotipificación. Cabe mencionar que cuando el laboratorio requiere la obtención de resultados rápidos, debe realizarse primero la serotipificación para realizar una identificación presuntiva puntual y posteriormente deberán ser confirmados por los factores X y V. (Perilla y cols., 2009)
Por lo que, la identificación de los serotipos Haemophilus influenzae se realiza a partir de una prueba de aglutinación en lámina, en donde previamente se realizará una suspensión por lo cual con un asa estéril se tomará al patógeno de la colonia respectiva del agar chocolate, pero este no debe tener el disco de bacitracina, o algún otro medio específico, de esta forma se preparará la suspensión en un vial con 25 microlitros de salina fisiológica formalinizada y con ayuda de un vortex mezclar. De este modo para la reacción de aglutinación en una lámina de vidrio se coloca una gota de la suspensión y una gota del antisuero polivalente sobre la gota de la suspensión, además, de forma adyacente se agrega una gota de solución salina sobre la gota final de la solución (figura 1) y finalmente mezclar la suspensión con un aplicador de madera, posteriormente observar si aglutina o no. (Perilla y cols., 2009; Pantigozo y cols., 2006)
Figura 1. Técnica de la reacción de aglutinación en lámina. Nota, adaptada del Manual de laboratorio para la identificación y prueba de susceptibilidad a los antimicrobianos de patógenos bacterianos de importancia para la salud pública en el mundo en desarrollo. [Fotografía], por Perilla y colaboradores. (2009). Recuperado de, Medicina & Laboratorio, 15(01-02), 69-91. |
De modo que sólo se consideran positivas las reacciones que presentan una aglutinación fuerte de modo que se debe observar de forma clara la agrupación de todas las células pero cuando una cepa reacciona con más de un antisuero o en salina se reporta como no tipificable, es decir no se puede clasificar siendo que este tipo no presenta cápsulas siendo las menos graves pero pueden causar infecciones no invasoras, sin embargo estos patógenos no capsulares son invasores en pacientes inmunodeprimidos. (Perilla y cols., 2009)
Cabe destacar que el serotipo b es un cocobacilo inmóvil no esporulado, pleomórfico en sus estadios tardíos que se diferencia de los demás por ser el patógeno más virulento y siendo que posee una cápsula está constituida por un polímero lineal de ribosil-ribitolfosfato (PRP) o también denominado polisacárido capsular b, por lo que es un elemento importante en la virulencia de la bacteria, además, se caracteriza por la presencia de bacteremia que es causado por la cápsula de tipo b mientras que los serotipos heterólogos (a, c, d, e y f) son incapaces de sobrevivir e invadir el torrente sanguíneo. (Perilla y cols., 2009; Gómez y cols., 1991)
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS.
Gómez, P., Cabrera, R., y Cravioto, A. (1991). Haemophilus influenzae B: una revisión sobre los determinantes de patogenicidad y de la respuesta inmune a la infección. Salud Pública de México, 33 (5): pp. 504-512. Recuperado de https://www.redalyc.org/pdf/106/10633508.pdf
Organización Panamericana de la Salud. (2021). Haemophilus influenzae. Organización Panamericana de la Salud. Recuperado el 26 de agosto de 2022, de https://www.paho.org/es/temas/haemophilus-influenzae#:~:text=%3E%20Personas%20en%20riesgo,los%2012%20meses%20de%20edad.
Pantigozo, P., Aguilar, E., Venero, S., y Quispe, M. (2006). Haemophilus influenzae, serotipificación y biotipificación de pacientes con iras del hospital essalud-cusco. SITUA, 15 (1,2): pp. 31-36. Recuperado de https://sisbib.unmsm.edu.pe/bVrevistas/situa/2006_n1-2/pdf/a06.pdf
Perilla, M. J., Ajello, G., Bopp, C., Elliott, J., Facklam, R., Knapp, J. S., & Dowell, S. F. (2009). Manual de laboratorio para la identificación y prueba de susceptibilidad a los antimicrobianos de patógenos bacterianos de importancia para la salud pública en el mundo en desarrollo. Medicina & Laboratorio, 15(01-02), 69-91. Recuperado de https://www.medigraphic.com/pdfs/medlab/myl-2009/myl091-2e.pdf
Zerón, A. (2010). Biotipos, fenotipos y genotipos. ¿De qué tipo somos?. Revista Mexicana de periodontología, 1 (1): pp. 36- 43. Recuperado de https://www.medigraphic.com/pdfs/periodontologia/mp-2010/mp101h.pdf